淺析β干擾素（IFN-β）LISA試劑盒的標本要求及原理

　　β干擾素(IFN-β)是一種多肽，通常由成纖維細胞產(chǎn)生，具有抗病毒和抗增殖的作用。IFN-β與它的受體結(jié)合，誘導(dǎo)出復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。在免疫細胞中(IFN-β在多發(fā)性硬化癥中最可能的治療效果的目標)，IFN-β減少抗原呈遞和T細胞增殖，改變細胞因子和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)表達，并恢復(fù)抑制功能。IFN-β的治療形式可以在細菌表達系統(tǒng)(IFN-beta1b)或哺乳動物細胞(IFN-beta1a)中產(chǎn)生。
 

　　β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的標本要求：
 

　　1、標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
 

　　2、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 

　　β干擾素(IFN-β)ELISA試劑盒的實驗原理：
 

　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人β干擾素(IFN-β)水平。用純化的人β干擾素(IFN-β)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β干擾素(IFN-β)，再與HRP標記的β干擾素(IFN-β)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β干擾素(IFN-β)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標準曲線計算樣品中人β干擾素(IFN-β)濃度。